TA的每日心情 | 開心 昨天 08:35 |
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簽到天數(shù): 213 天 [LV.7]常住居民III
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老式分光光度計(jì)(也叫分光光度計(jì))是一種用于測量物質(zhì)吸光度(或透過率)與波長關(guān)系的儀器,廣泛應(yīng)用于化學(xué)分析、生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。分光光度計(jì)的原理基于比爾定律(Beer-Lambert Law),即物質(zhì)吸收的光強(qiáng)度與其濃度和光路長度成正比。
老式分光光度計(jì)通常由以下主要部分組成:
光源:提供白光,通常使用氘燈、鎢燈等。
單色儀(分光器):將白光分解成不同波長的單色光。
樣品室:放置待測樣品。
光電檢測器:檢測透過樣品的光,并轉(zhuǎn)化為電信號。
顯示器/讀數(shù)裝置:顯示吸光度或透過率的數(shù)值。
使用步驟:
1. 準(zhǔn)備樣品
液體樣品:通常將樣品放在透明的比色管或光路容器中,確保容器潔凈且無氣泡。
固體樣品:如果是固體,可能需要研磨成粉末或溶解在適當(dāng)溶劑中,才能進(jìn)行測量。
2. 打開儀器
打開分光光度計(jì)的電源,等待儀器預(yù)熱和穩(wěn)定。
確保光源和單色儀已經(jīng)正常工作。
3. 選擇波長
老式分光光度計(jì)上通常有一個(gè)旋鈕或控制按鈕用于設(shè)置波長。通過這個(gè)控制裝置,選擇你需要測量的波長(單位通常是納米,nm)。
如果不確定最佳波長,可以根據(jù)待測物質(zhì)的吸收光譜選擇最合適的波長。
4. 校準(zhǔn)儀器(空白對照)
在測量之前,需要使用“空白對照”來進(jìn)行校準(zhǔn)。空白樣品是指不含待測物質(zhì)的溶液,通常是溶劑本身(例如水、緩沖液等)。
將空白樣品放入比色管或樣品室,確保光路沒有任何障礙物。
調(diào)整儀器,使其顯示0吸光度或100%透過率,這樣儀器就被“歸零”了,準(zhǔn)備測量待測樣品。
5. 測量樣品
將待測樣品放入樣品室,確保光路通暢,樣品沒有氣泡。
儀器會(huì)測量透過樣品的光的強(qiáng)度,并計(jì)算出樣品的吸光度(Absorbance, A)或透過率(Transmittance, T)。
吸光度 (A) 通常是通過儀器顯示,數(shù)值越大表示樣品吸光度越強(qiáng),反之則越弱。
吸光度與透過率之間有關(guān)系:
A=?log?T
A=?logT
T=10?A
T=10?A
其中,TT是透過率,AA是吸光度。
6. 讀取結(jié)果
儀器會(huì)顯示樣品在選定波長下的吸光度值,通常顯示的是一個(gè)數(shù)字,可能在顯示屏上顯示出來。
對于定量分析,吸光度與樣品濃度是成正比的,可以通過比爾定律進(jìn)行計(jì)算:
A=εcl
A=εcl
其中,AA是吸光度,εε是摩爾吸光系數(shù)(物質(zhì)特性,常常通過文獻(xiàn)查得),cc是樣品濃度,ll是光程(通常為比色管的長度)。
7. 記錄數(shù)據(jù)
根據(jù)吸光度和已知的摩爾吸光系數(shù)(如果需要),可以計(jì)算樣品的濃度。
將結(jié)果記錄下來,并根據(jù)需要進(jìn)行分析。
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