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標題: 膠柱是正相還是反相 [打印本頁]

作者: 程曦智能 時間: 2024-10-18 09:53
標題: 膠柱是正相還是反相
膠柱（通常指的是凝膠滲透色譜柱或凝膠過濾色譜柱，Gel Permeation Chromatography, GPC 或 Gel Filtration Chromatography, GFC）主要用于分離大分子物質，如聚合物、蛋白質、多糖等。膠柱的分離機制與正相色譜和反相色譜不同，它主要是基于分子大小的分離，而不是基于極性或疏水性的分離。
凝膠滲透色譜（GPC）/凝膠過濾色譜（GFC）的分離機制
分離原理：
分子篩效應：膠柱中的填料是由多孔凝膠顆粒組成的。這些凝膠顆粒的孔徑大小是固定的，不同大小的分子在通過這些孔隙時會有不同的行為。
大分子：大分子無法進入凝膠顆粒的孔隙，因此會首先流出柱子。
小分子：小分子可以進入凝膠顆粒的孔隙，因此會花費更多時間在柱子中停留，最后流出柱子。
中等分子：中等大小的分子部分進入孔隙，部分在柱外流動，因此流出時間介于大分子和小分子之間。
填料材料：
常用填料：包括交聯葡聚糖（Sephadex）、聚丙烯酰胺（Porous Polystyrene-Divinylbenzene, PS-DVB）、硅膠基質等。
孔徑大小：填料的孔徑大小決定了可以分離的分子大小范圍。
正相色譜 vs 反相色譜
正相色譜：
固定相：極性固定相，如硅膠、氨基硅烷、氰基硅烷等。
流動相：非極性或弱極性溶劑，如正己烷、環己烷等。
分離機制：基于樣品組分的極性差異，極性組分與固定相的相互作用較強，保留時間較長。
反相色譜：
固定相：非極性固定相，如C18、C8等。
流動相：極性溶劑，如水、甲醇、乙腈等。
分離機制：基于樣品組分的疏水性差異，疏水性組分與固定相的相互作用較強，保留時間較長。
膠柱與正相/反相色譜的對比
分離機制：膠柱基于分子大小的分離，而正相和反相色譜基于極性或疏水性的分離。
應用范圍：膠柱主要用于大分子物質的分離，如聚合物、蛋白質、多糖等；正相和反相色譜主要用于小分子物質的分離，如藥物、有機化合物等。
總結
膠柱（GPC/GFC）既不是正相色譜柱，也不是反相色譜柱。它是一種基于分子大小分離的色譜柱，適用于大分子物質的分離。正相色譜和反相色譜則是基于極性或疏水性分離的色譜技術，適用于小分子物質的分離。

作者: 幽默肥仔龍 時間: 2024-10-28 16:33
非常感謝，你的分享讓我對這個問題有了更深入的理解。

作者: 33333 時間: 2024-11-23 00:17
感謝大家的分享，讓我對這個問題有了更全面的認識。

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